Это второй вариант сюжета: первую «Юдифь» Артемизия написала около 1612 года, и она хранится в Неаполе. Флорентийскую версию заказал великий герцог Тосканский Козимо II Медичи; Артемизия писала её в Риме, где снова могла смотреть на Караваджо.

Во Флоренции натурализм картины шокировал, и в галерею её поначалу не допустили. Оплату сильно задержали — Артемизии помог выхлопотать её Галилей, а сам Козимо II умер в 1621 году. В 1993 году полотно пострадало при взрыве бомбы во Флоренции и было отреставрировано.